Zetaview를 통한 다발성 골수종 뼈 질환과 종양 발달에 역할을 하는 엑소좀 분석  Authors: Sylvia Faict₁, Joséphine Muller₂, Kim De Veirman₁, Elke De Bruyne ₁ , Ken Maes ₁ , Louise Vrancken₂,₅, Roy Heusschen ₂, Hendrik De Raeve₃, Rik Schots₄, Karin Vanderkerken ₁ , Jo Caers ₂,₅ and Eline Menu ₁  이번 포스팅에서는 'Exsomes play a role in multiple myeloma bone disease andtumor development by targeting osteocalasts and osteoblasts' 논문 중 Z..

Use of Fluorescence Nanoparticle Tracking Analysis as a tool for quality assessment of EVs​세포외소포(EV)의 적절한 보관과 표준화된 조건은 바이오뱅크 임상 샘플의 안정성과 치료용 EV의 일관된 배치 생산을 위한 핵심 요소이자 전제 조건입니다[1-2]. 부적절한 보관 조건으로 인한 EV 농도 손실은 활성 감소와 물리적 무결성을 동반합니다. 결과적으로 생화학적 표현형 분석에 사용되는 표면 단백질은 분해되거나 기능이 제한될 수 있습니다[3-6].  이 실험에서 CD63 dTomato를 과발현하는 HEK293T 유래 EV는 CD63 APC 및 CD81 BV421로 동시에 형광 표지 되었습니다. 라벨링(Labeling) 및 형광 NTA(F-..

형광 NTA 분석을 이용한 EVs 내 핵산 카고의 검출Detection of nucleic acid cargo in EVs by using Fluorescence Nanoparticle Tracking Analysis  과거에는 세포외소포(EV)의 특성화가 주로 단백질과 지질에초점을 맞췄지만[1-2], 현재는 EV의 핵산 카고(Nucleic acid cargo) 연구에대한 관심이 증가하고 있습니다. 형광 나노입자추적분석(F-NTA)을 사용하면 세포밖소포(EVs)로부터세포막에 연결된 핵산(Membrane-sccociated nucleic acids)을검출할 수 있습니다.  이 실험에서는 변성 요소(Denaturing urea), 글리옥살(Glyoxal) 및포르알데히드 겔(Formaldehyde gel)에서..

안녕하세요. Particle Metrix GmbH 사의 국내 단독 대리점 위드인스트루먼트입니다. 이번 포스팅에서는 PMX-430, QUATT Zetaview®를 이용하여 기능화된 25nm Quantum dot (Functionalized QDs) 샘플(ID : Invitgogen™ Qdot™ 655 Streptavidin conjugates) 을 형광 나노입자추적(Fluorescence NTA, F-NTA) 방법으로 분석하는 과정을 설명드리고자 합니다. NTA(Nano particle Tracking Analysis) 방식으로 얼마나 작은 나노 입자까지 감지하기 위해 기술 개발이 될 수 있을지는 불확실하지만, Streptavidin(S-QDs)으로 기능화된 25nm Quantum dots을 ..

C-NTA(Colocalization-NTA) QUATT Zetaveiw®를 통한 다중 염색 혈소판에서 유래된 MSC-EV(중간엽 줄기세포 세포밖소포체)의 분석 안녕하세요. 독일 Particle Metrix GmbH 사의 국내 단독 대리점, 위드인스트루먼트 입니다. 지난 5월 19일 ISEV2023 (International Society for Extracellular Vesicles, 국제 세포밖소포체학회)에서 QUATT Zetaveiw® 시스템을 통한 Colocalization에 대해 Dr. Clemens의 발표가 있었습니다. ​ 작년 하반기에 Twin Zetaview® 시스템을 통한 Colocalization 기능이 발표된지 얼마 되지 않아 레이저 4개가 동시 장착된 QUATT Zetaveiw® ..

안녕하세요. Particle Metrix GmbH 사의 국내 단독 대리점, 위드인스트루먼트입니다. 이번 포스팅에서는 Colocalization-NTA, C-NTA 분석기인 Zetaveiw를 이용하여 CD9과 CD41로 이중 형광 염색된 인간 혈소판 유래 MSC-EVs(Extracellular Vesicles)의 이중 형광 검출 방법을 설명 드리겠습니다. 약 10여년간 NTA(Nano particle Tracking Analysis)는 EVs의 특성을 하기위한 기술로서 확립되었습니다. 처음 NTA는 Scatter mode에서 EV의 크기분포, 농도의 측정에 사용되었고 이후 Fluorescence-NTA가 개발되며 형광 표정 분석이 가능해지게 되어 연구 분야의 동향에 맞는 혁신적인 위치에 도달하였습니다. 새..

안녕하세요. Particle Metrix GmbH 사의 국내 단독 대리점 위드인스트루먼트입니다. ​ 이번 포스팅에서는 EVs(Extracellular Vesicles)의 보관 온도와 그에 따른 생물학적 활성도 및 EVs에 미치는 영향을 설명 드리겠습니다. Nano particle Tracking Analysis(NTA분석법)을 이용한 나노입자추적분석기, 나노입자추적분석시스템인 Zetaview®가 실험에 사용되었습니다. EVs 입자들에 대한 size 또는 protein의 정량과 같은 물리적 특징은 연구가 많이 되었지만, EVs의 다양한 기능들이 면역 체계 발달, 세포 항상성과 같은 기능적인 안정성을 위한 EVs의 다양한 보관 조건이 일관된 체외 연구나 치료 연구에서 중요합니다. ​ 인간 탯줄 정맥 내피 세..

EVs에 3종 antibody labelling 후 Zetaview®를 이용한 분석 절차 안녕하세요. Particle Metrix GmbH 사의 국내 단독 대리점, 위드인스트루먼트입니다. 이번 포스팅에서는 EVs[Extracellular Vesicles]에 3가지 Tetraspanins (membrane protein antibody, CD9, CD3, CD81)를 이용하여 Alexa488로 형광 염색하는 절차와 Zetaview를 이용한 측정 절차를 설명 드리겠습니다. 실험 준비물 1. Fresh EVs 혹은 동결건조 EVs 100ug (HCT116 cell, HBM-HCT-100. Hansa Biomed Life Science) 2. Yellow-green 형광 polystyrene beads (#70..

안녕하세요^^ Particle Metrix GmbH 사의 국내 단독 대리점 위드인스트루먼트입니다. 이번 포스팅에서는 Zetaview를 활용하여 EVs[Extracellular Vesicles] membrane dye의 형광 염색 절차와 Zetaview를 이용한 측정 절차를 설명 드리겠습니다. 실험 준비물 Fresh EVs 혹은 동결건조 EVs 100㎍ (HCT116 cell, HBM-HCT-100. Hansa Biomed Life Science) Cell Mask™ Green (CMG), C37608. Life Technology Particle free PBS (혹은 다른 설정된 buffer) Zetaview NTA[model PMX x20이상] 형광 추적 기능이 있고, 488nm laser가 장착된 ..

초고속 원심 분리법 및 3종 Kit를 통해 분리된 혈청 유래 Exocome의 Zetaview®를 이용한 분석 안녕하세요. Particle Metrix GmbH 사의 국내 단독 대리점, 위드인스트루먼트입니다. 이번 포스팅에서는 Zetaview를 활용하여 초고속 원심분리법과 3가지 Exosome Kit로 분리한 혈청 유래 Exosome 비교 연구 내용을 분석했습니다. Exosome은 세포 간 신호 전달 및 Biomarker 역할을 하기 때문에 신뢰할 수 있을 품질의 Exosome을 얻어내기 위한 과정이 가장 중요합니다. ​ 초고속 원심분리 (Ultracentrifuge[UC]) 법과 추가적으로 세 가지 Exosome isolation kit [miRCURY, ExoQuick, TEIR(Total Exosom..