테트라스파닌 염색과 제타 전위 분석을 통한 엑소좀의 품질평가Multi-parameter quality assessment of exosomes by using specific tetraspanin staining combined with zeta potential analysis Authors: Dr. Sascha Raschke, Dr. Christina Klasen, Dr. Henry Dehne, Dr. Lena Ball, Particle Metrix GmbH, Inning, Germany  개요​세포외소포(EV)가 연구를 위해 정제되거나, 생물 의학 표준으로 생산되거나, 특정 세포에서 안전하고 효과적인 치료제를 상용화될 때, 몇 가지 품질 속성이 보장되어야 합니다. 나노입자추적분석(NTA)은 단일 입..

Zetaview를 통한 다발성 골수종 뼈 질환과 종양 발달에 역할을 하는 엑소좀 분석  Authors: Sylvia Faict₁, Joséphine Muller₂, Kim De Veirman₁, Elke De Bruyne ₁ , Ken Maes ₁ , Louise Vrancken₂,₅, Roy Heusschen ₂, Hendrik De Raeve₃, Rik Schots₄, Karin Vanderkerken ₁ , Jo Caers ₂,₅ and Eline Menu ₁  이번 포스팅에서는 'Exsomes play a role in multiple myeloma bone disease andtumor development by targeting osteocalasts and osteoblasts' 논문 중 Z..

형광 NTA 분석을 이용한 EVs 내 핵산 카고의 검출Detection of nucleic acid cargo in EVs by using Fluorescence Nanoparticle Tracking Analysis  과거에는 세포외소포(EV)의 특성화가 주로 단백질과 지질에초점을 맞췄지만[1-2], 현재는 EV의 핵산 카고(Nucleic acid cargo) 연구에대한 관심이 증가하고 있습니다. 형광 나노입자추적분석(F-NTA)을 사용하면 세포밖소포(EVs)로부터세포막에 연결된 핵산(Membrane-sccociated nucleic acids)을검출할 수 있습니다.  이 실험에서는 변성 요소(Denaturing urea), 글리옥살(Glyoxal) 및포르알데히드 겔(Formaldehyde gel)에서..

안녕하세요. Particle Metrix GmbH 사의 국내 단독 대리점 위드인스트루먼트입니다. 이번 포스팅에서는 PMX-430, QUATT Zetaview®를 이용하여 기능화된 25nm Quantum dot (Functionalized QDs) 샘플(ID : Invitgogen™ Qdot™ 655 Streptavidin conjugates) 을 형광 나노입자추적(Fluorescence NTA, F-NTA) 방법으로 분석하는 과정을 설명드리고자 합니다. NTA(Nano particle Tracking Analysis) 방식으로 얼마나 작은 나노 입자까지 감지하기 위해 기술 개발이 될 수 있을지는 불확실하지만, Streptavidin(S-QDs)으로 기능화된 25nm Quantum dots을 ..

안녕하세요. Particle Metrix GmbH 사의 국내 단독 대리점, 위드인스트루먼트입니다. 이번 포스팅에서는 Colocalization-NTA, C-NTA 분석기인 Zetaveiw를 이용하여 CD9과 CD41로 이중 형광 염색된 인간 혈소판 유래 MSC-EVs(Extracellular Vesicles)의 이중 형광 검출 방법을 설명 드리겠습니다. 약 10여년간 NTA(Nano particle Tracking Analysis)는 EVs의 특성을 하기위한 기술로서 확립되었습니다. 처음 NTA는 Scatter mode에서 EV의 크기분포, 농도의 측정에 사용되었고 이후 Fluorescence-NTA가 개발되며 형광 표정 분석이 가능해지게 되어 연구 분야의 동향에 맞는 혁신적인 위치에 도달하였습니다. 새..

안녕하세요. Particle Metrix GmbH 사의 국내 단독 대리점 위드인스트루먼트입니다. ​ 이번 포스팅에서는 EVs(Extracellular Vesicles)의 보관 온도와 그에 따른 생물학적 활성도 및 EVs에 미치는 영향을 설명 드리겠습니다. Nano particle Tracking Analysis(NTA분석법)을 이용한 나노입자추적분석기, 나노입자추적분석시스템인 Zetaview®가 실험에 사용되었습니다. EVs 입자들에 대한 size 또는 protein의 정량과 같은 물리적 특징은 연구가 많이 되었지만, EVs의 다양한 기능들이 면역 체계 발달, 세포 항상성과 같은 기능적인 안정성을 위한 EVs의 다양한 보관 조건이 일관된 체외 연구나 치료 연구에서 중요합니다. ​ 인간 탯줄 정맥 내피 세..

EVs에 3종 antibody labelling 후 Zetaview®를 이용한 분석 절차 안녕하세요. Particle Metrix GmbH 사의 국내 단독 대리점, 위드인스트루먼트입니다. 이번 포스팅에서는 EVs[Extracellular Vesicles]에 3가지 Tetraspanins (membrane protein antibody, CD9, CD3, CD81)를 이용하여 Alexa488로 형광 염색하는 절차와 Zetaview를 이용한 측정 절차를 설명 드리겠습니다. 실험 준비물 1. Fresh EVs 혹은 동결건조 EVs 100ug (HCT116 cell, HBM-HCT-100. Hansa Biomed Life Science) 2. Yellow-green 형광 polystyrene beads (#70..

안녕하세요^^ Particle Metrix GmbH 사의 국내 단독 대리점 위드인스트루먼트입니다. 이번 포스팅에서는 Zetaview를 활용하여 EVs[Extracellular Vesicles] membrane dye의 형광 염색 절차와 Zetaview를 이용한 측정 절차를 설명 드리겠습니다. 실험 준비물 Fresh EVs 혹은 동결건조 EVs 100㎍ (HCT116 cell, HBM-HCT-100. Hansa Biomed Life Science) Cell Mask™ Green (CMG), C37608. Life Technology Particle free PBS (혹은 다른 설정된 buffer) Zetaview NTA[model PMX x20이상] 형광 추적 기능이 있고, 488nm laser가 장착된 ..

초고속 원심 분리법 및 3종 Kit를 통해 분리된 혈청 유래 Exocome의 Zetaview®를 이용한 분석 안녕하세요. Particle Metrix GmbH 사의 국내 단독 대리점, 위드인스트루먼트입니다. 이번 포스팅에서는 Zetaview를 활용하여 초고속 원심분리법과 3가지 Exosome Kit로 분리한 혈청 유래 Exosome 비교 연구 내용을 분석했습니다. Exosome은 세포 간 신호 전달 및 Biomarker 역할을 하기 때문에 신뢰할 수 있을 품질의 Exosome을 얻어내기 위한 과정이 가장 중요합니다. ​ 초고속 원심분리 (Ultracentrifuge[UC]) 법과 추가적으로 세 가지 Exosome isolation kit [miRCURY, ExoQuick, TEIR(Total Exosom..

안녕하세요. Particle Metrix GmbH 사의 국내 단독 대리점, 위드인스트루먼트입니다. 이번에는 Zetaview를 활용하여 엑소좀(Exosome)을 포함한 세포 외 소포체(Extracelluar Vesicles [EVs])의 제타 전위 (Zeta Potential [ZP]) 분석한 결과에 대한 내용을 소개 드리고자 합니다. ZP는 입자 (particle)의 표면 전위를 측정하는 것에 널리 사용되는 방법이며 일반적으로 입자가 띈 표면 전하의 지표로 사용되고 있습니다. 콜로이드의 분산 안정성 (Colloid Stability)은 표면 화학, 생물학적 결합, 적용된 이론적 모델에 영향을 받습니다. ZP에 영향을 주는 요소들을 조사하였습니다. EVs는 Choriocarcinoma(융모막암종) 유래 J..