EVs에 3종 antibody labelling 후 Zetaview®를 이용한 분석 절차 안녕하세요. Particle Metrix GmbH 사의 국내 단독 대리점, 위드인스트루먼트입니다. 이번 포스팅에서는 EVs[Extracellular Vesicles]에 3가지 Tetraspanins (membrane protein antibody, CD9, CD3, CD81)를 이용하여 Alexa488로 형광 염색하는 절차와 Zetaview를 이용한 측정 절차를 설명 드리겠습니다. 실험 준비물 1. Fresh EVs 혹은 동결건조 EVs 100ug (HCT116 cell, HBM-HCT-100. Hansa Biomed Life Science) 2. Yellow-green 형광 polystyrene beads (#70..

안녕하세요^^ Particle Metrix GmbH 사의 국내 단독 대리점 위드인스트루먼트입니다. 이번 포스팅에서는 Zetaview를 활용하여 EVs[Extracellular Vesicles] membrane dye의 형광 염색 절차와 Zetaview를 이용한 측정 절차를 설명 드리겠습니다. 실험 준비물 Fresh EVs 혹은 동결건조 EVs 100㎍ (HCT116 cell, HBM-HCT-100. Hansa Biomed Life Science) Cell Mask™ Green (CMG), C37608. Life Technology Particle free PBS (혹은 다른 설정된 buffer) Zetaview NTA[model PMX x20이상] 형광 추적 기능이 있고, 488nm laser가 장착된 ..

초고속 원심 분리법 및 3종 Kit를 통해 분리된 혈청 유래 Exocome의 Zetaview®를 이용한 분석 안녕하세요. Particle Metrix GmbH 사의 국내 단독 대리점, 위드인스트루먼트입니다. 이번 포스팅에서는 Zetaview를 활용하여 초고속 원심분리법과 3가지 Exosome Kit로 분리한 혈청 유래 Exosome 비교 연구 내용을 분석했습니다. Exosome은 세포 간 신호 전달 및 Biomarker 역할을 하기 때문에 신뢰할 수 있을 품질의 Exosome을 얻어내기 위한 과정이 가장 중요합니다. ​ 초고속 원심분리 (Ultracentrifuge[UC]) 법과 추가적으로 세 가지 Exosome isolation kit [miRCURY, ExoQuick, TEIR(Total Exosom..

안녕하세요. Particle Metrix GmbH 사의 국내 단독 대리점, 위드인스트루먼트입니다. 이번에는 Zetaview를 활용하여 엑소좀(Exosome)을 포함한 세포 외 소포체(Extracelluar Vesicles [EVs])의 제타 전위 (Zeta Potential [ZP]) 분석한 결과에 대한 내용을 소개 드리고자 합니다. ZP는 입자 (particle)의 표면 전위를 측정하는 것에 널리 사용되는 방법이며 일반적으로 입자가 띈 표면 전하의 지표로 사용되고 있습니다. 콜로이드의 분산 안정성 (Colloid Stability)은 표면 화학, 생물학적 결합, 적용된 이론적 모델에 영향을 받습니다. ZP에 영향을 주는 요소들을 조사하였습니다. EVs는 Choriocarcinoma(융모막암종) 유래 J..

안녕하세요. Particle Metrix GmbH 社의 국내 단독 대리점, 위드인스트루먼트입니다. 이번 포스팅에서는 Zetaview®의 측정에 있어 Sample을 Vortexing에 의해 달라지는 분석 결과를 설명하고자 합니다. 일부 NTA 분석기, 나노 입자 추적 분석기를 사용하시는 분들 중 Sample을 dilution 할 때, 더욱 잘 이루어지기 위해 희석 전, 후에 Vortex mixer를 사용하는 경우가 있습니다. 물론, Sample의 혼합이 보다 더 잘 될 수 있지만 vortexer에 의해 발생되는 Nano Bubble과 Sample 외 다른 data가 Zetaview® 결과에 포함되어 나타는 경우를 우려해 권장하지 않고 있습니다. EV Sample이 vortexing 시간 경과에 따라 dat..

안녕하세요. Particle Metrix GmbH 社의 국내 단독 대리점 위드인스트루먼트입니다. NTA (Nano paricle Tracking Analysis) 방식을 이용하여 EVs (Extracellular Vesicles) 특성 측정이 가능한 장비인 Zetaview®와 타사의 NTA 장비와의 정확성 및 반복성을 비교한 논문의 결과를 포스팅하고자 합니다. EVs 연구분야의 확장에 따라 단일 EV의 특성 확인을 위해 정확하고 재현 가능한 방법을 필요로 하고 있으며, NTA는 일반적으로 EV의 농도 및 크기와 형광 분석을 하는데 사용됩니다. 물론, Zetaview®는 타 NTA 분석기가 가지고 있지 않은 제타 전위 (Zata Potential), Colocalization, Subpopulations ..

안녕하세요. Particle Metrix GmbH 社의 국내 단독 대리점, 위드인스트루먼트입니다. 이번 포스팅에서는 Zetaview®의 Nano particle Tracking Analysis (NTA)의 원리에 대해 설명드리겠습니다. Nano particle Tracking Analysis (NTA)는 현탁액에서 10 ~ 2000nm 직경 범위의 나노 입자를 추적하는 분석 기술로 현미경의 설정을 통해 기존 현미경의 회절 한계 이하의 입자를 산란 모드, 형광 모드에서 실시간으로 시각화할 수 있습니다. 나노 크기의 금속 입자부터 OMV (Outer Membrane Vesicle), LNP (Lipid NanoParticle), Virus나 Extracellular vesicles, Exosome과 같은 b..

안녕하세요. 독일 Particle Metrix GmbH사의 국내 단독 대리점, 위드인스트루먼트입니다. 이번 포스팅에서는 Zetaview 소프트웨어가 8.15.16 SP2로 업데이트되면서 변경된 레포트를 소개드리고자 합니다. PMX-120, PMX-220, PMX-420 모델에서 PMX-130, PMX-230, PMX-430 모델로 업그레이드 되면서 소프트웨어도 함께 업데이트되어 레포트 양식 및 기존 버그가 수정되어 아래의 결과 레포트와 같이 추가된 부분, 변경된 부분이 있습니다. 1. 분석에 사용된 기기의 기관명, 전화 번호, 이메일 주소를 소프트웨어 상에서 설정하면 레포트 상단에 함께 출력됩니다. 2. SOP에서 저장될 File 이름과 샘플명을 다르게 설정할 수 있습니다. 3. 측정에 사용된 레이저 파..

이번 포스팅에서는 독일 Particle Metrix GmbH사의 Zetaview® 나노입자추적분석기 (NTA분석기)의 Operation, 운용 절차를 알아보겠습니다. [MONO Zetaview : PMX-120] [TWIN Zetaview : PMX-220] [QUATT Zetaview : PMX-420] 먼저 , Sample Cell의 구조에 대해 알아보겠습니다. Zetaview의 Sample Cell은 직육면체 구조로 아래의 사진과 같이 Cell Assembly에 Cell Carrier에 끼워진 채로 장착되게 됩니다. Laser와 Camera가 90도 각도를 유지하면서 Sample Cell의 11군데 Positions를 움직이면서 측정과 이동을 반복합니다. Position 0이 기기 안 쪽 Sampl..

NTA & miRNA Microarrays NTA 분석법과 마이크로RNA칩 분석법 [Zetaview 관련 논문] HIV-Nef and ADAM17-Containing Plasma Extracellular Vesicles Induce and Correlate with Immune Pathogenesis in Chronic HIV Infection HIV-Nef 및 ADAM17 함유 혈장(Plasma) 세포 외 소포(EVs)와 만성 HIV 감염에 대한 면역적 발병과의 연관성 Jung-Hyun Lee a, Stephan Schierer a, Katja Blume a, Jochen Dindorf a, SebastianWittki a,Wei Xiang b, Christian Ostalecki a, Nina Kol..