테트라스파닌 염색과 제타 전위 분석을 통한 엑소좀의 품질평가Multi-parameter quality assessment of exosomes by using specific tetraspanin staining combined with zeta potential analysis Authors: Dr. Sascha Raschke, Dr. Christina Klasen, Dr. Henry Dehne, Dr. Lena Ball, Particle Metrix GmbH, Inning, Germany  개요​세포외소포(EV)가 연구를 위해 정제되거나, 생물 의학 표준으로 생산되거나, 특정 세포에서 안전하고 효과적인 치료제를 상용화될 때, 몇 가지 품질 속성이 보장되어야 합니다. 나노입자추적분석(NTA)은 단일 입..

형광 NTA 분석을 이용한 EVs 내 핵산 카고의 검출Detection of nucleic acid cargo in EVs by using Fluorescence Nanoparticle Tracking Analysis  과거에는 세포외소포(EV)의 특성화가 주로 단백질과 지질에초점을 맞췄지만[1-2], 현재는 EV의 핵산 카고(Nucleic acid cargo) 연구에대한 관심이 증가하고 있습니다. 형광 나노입자추적분석(F-NTA)을 사용하면 세포밖소포(EVs)로부터세포막에 연결된 핵산(Membrane-sccociated nucleic acids)을검출할 수 있습니다.  이 실험에서는 변성 요소(Denaturing urea), 글리옥살(Glyoxal) 및포르알데히드 겔(Formaldehyde gel)에서..

안녕하세요. Particle Metrix GmbH 사의 국내 단독 대리점 위드인스트루먼트입니다. 이번 포스팅에서는 PMX-430, QUATT Zetaview®를 이용하여 기능화된 25nm Quantum dot (Functionalized QDs) 샘플(ID : Invitgogen™ Qdot™ 655 Streptavidin conjugates) 을 형광 나노입자추적(Fluorescence NTA, F-NTA) 방법으로 분석하는 과정을 설명드리고자 합니다. NTA(Nano particle Tracking Analysis) 방식으로 얼마나 작은 나노 입자까지 감지하기 위해 기술 개발이 될 수 있을지는 불확실하지만, Streptavidin(S-QDs)으로 기능화된 25nm Quantum dots을 ..

안녕하세요. Particle Metrix GmbH 사의 국내 단독 대리점, 위드인스트루먼트입니다. 이번 포스팅에서는 Colocalization-NTA, C-NTA 분석기인 Zetaveiw를 이용하여 CD9과 CD41로 이중 형광 염색된 인간 혈소판 유래 MSC-EVs(Extracellular Vesicles)의 이중 형광 검출 방법을 설명 드리겠습니다. 약 10여년간 NTA(Nano particle Tracking Analysis)는 EVs의 특성을 하기위한 기술로서 확립되었습니다. 처음 NTA는 Scatter mode에서 EV의 크기분포, 농도의 측정에 사용되었고 이후 Fluorescence-NTA가 개발되며 형광 표정 분석이 가능해지게 되어 연구 분야의 동향에 맞는 혁신적인 위치에 도달하였습니다. 새..

EVs에 3종 antibody labelling 후 Zetaview®를 이용한 분석 절차 안녕하세요. Particle Metrix GmbH 사의 국내 단독 대리점, 위드인스트루먼트입니다. 이번 포스팅에서는 EVs[Extracellular Vesicles]에 3가지 Tetraspanins (membrane protein antibody, CD9, CD3, CD81)를 이용하여 Alexa488로 형광 염색하는 절차와 Zetaview를 이용한 측정 절차를 설명 드리겠습니다. 실험 준비물 1. Fresh EVs 혹은 동결건조 EVs 100ug (HCT116 cell, HBM-HCT-100. Hansa Biomed Life Science) 2. Yellow-green 형광 polystyrene beads (#70..

안녕하세요. Particle Metrix GmbH 社의 국내 단독 대리점, 위드인스트루먼트입니다. 이번 포스팅에서는 Zetaview®의 Nano particle Tracking Analysis (NTA)의 원리에 대해 설명드리겠습니다. Nano particle Tracking Analysis (NTA)는 현탁액에서 10 ~ 2000nm 직경 범위의 나노 입자를 추적하는 분석 기술로 현미경의 설정을 통해 기존 현미경의 회절 한계 이하의 입자를 산란 모드, 형광 모드에서 실시간으로 시각화할 수 있습니다. 나노 크기의 금속 입자부터 OMV (Outer Membrane Vesicle), LNP (Lipid NanoParticle), Virus나 Extracellular vesicles, Exosome과 같은 b..

이번 포스팅에서는 독일 Particle Metrix GmbH사의 Zetaview® 나노입자추적분석기 (NTA분석기)의 Operation, 운용 절차를 알아보겠습니다. [MONO Zetaview : PMX-120] [TWIN Zetaview : PMX-220] [QUATT Zetaview : PMX-420] 먼저 , Sample Cell의 구조에 대해 알아보겠습니다. Zetaview의 Sample Cell은 직육면체 구조로 아래의 사진과 같이 Cell Assembly에 Cell Carrier에 끼워진 채로 장착되게 됩니다. Laser와 Camera가 90도 각도를 유지하면서 Sample Cell의 11군데 Positions를 움직이면서 측정과 이동을 반복합니다. Position 0이 기기 안 쪽 Sampl..