이번 포스팅에서는 독일 Particle Metrix GmbH사의 Zetaview® 나노입자추적분석기 (NTA분석기)의 Operation, 운용 절차를 알아보겠습니다.
[MONO Zetaview : PMX-120] [TWIN Zetaview : PMX-220] [QUATT Zetaview : PMX-420]
먼저 , Sample Cell의 구조에 대해 알아보겠습니다.
Zetaview의 Sample Cell은 직육면체 구조로 아래의 사진과 같이 Cell Assembly에 Cell Carrier에 끼워진 채로 장착되게 됩니다.
Laser와 Camera가 90도 각도를 유지하면서 Sample Cell의 11군데 Positions를 움직이면서 측정과 이동을 반복합니다.
Position 0이 기기 안 쪽 Sample Cell의 벽면, Position 1이 기기 바깥 쪽 Sample Cell의 벽면으로 측정은 하지 않습니다.
Position 0.1~0.9, SL1(약 0.15), SL2(약 0.85) 11군데 지점에서 Size와 Concentration을 측정하며, SL1, SL2 Positions에서는 Zeta Potential을 측정합니다.
■ 운용 절차
1. Zetaview 본체의 전원과 운용 PC 전원을 켠 후 Zetaview 소프트웨어를 실행합니다.
2. Initialization 초기화가 진행되면서 Rinse Cell 팝업에서 Rinse 버튼을 클릭하면 Pump1 또는 Pump2에 연결된 Bottle 내의 DI Water, PBS 등 Buffer가 Sample Cell로 자동 주입되면서 Waste Bottle로 빠져나가게 되어 Sample Cell을 약 2분 30초 정도 자동 세척합니다. (Skip을 누르고 수동으로도 진행할 수 있습니다.)
3. Cell Quality Check 팝업 박스에서 OK를 누르면 Sample Cell이 얼마나 깨끗한 상태인지
Very Good, Good, Not Acceptable 3단계의 상태가 표시되며, Very Good이나 Good이 표기될 때까지 Pump와 Syringe를 통해 Cell을 세척합니다.
4. Pump & Temp 탭의 Temperature Control 스위치를 ON으로 변경하여 Sample Cell의 온도를 일정한 온도로 유지합니다. (주위 온도보다 약간 낮은 온도로 설정 추천)
5. Polystyrene 100nm 표준 샘플을 250,000 : 1로 Dilution한 후 주입합니다.
6. Auto Alignment 버튼을 클릭하여 Laser와 Camera의 정렬과 미세 Focus를 자동 조정하고 11군데 지점의 Zeta Potential을 측정(Auto symmetry)하여 Sample Cell의 상태를 다시 한 번 체크합니다.
7. Sample Cell이 깨끗한 상태이면 아래와 같이 준비가 완료되었다는 팝업이 표시됩니다.
8. Sample을 준비하고 Sample을 희석한 Buffer를 Pump와 연결된 Bottle에 넣어준 후 Pump를 작동시켜 Cleaning을 하고 Syringe로도 함께 Buffer를 주입합니다.
9. Sample을 Cell Assembly 앞의 보라색 Check Valve에 Syringe를 통해 주입합니다.
10. Measurement – Run Video Acquisition 버튼을 클릭하면 SOP 팝업이 뜨게 되고 주입한 Sample에 알맞은 SOP를 선택합니다. EX.> EVs_488_Scatter 등
11. OK 버튼을 누르면 분석이 진행되고 완료되면 Report, Raw Data, 11 positions Data, FCS확장자, AVI 동영상이 자동 저장됩니다.
12. 다음 Sample 분석을 위해Buffer를 Pump와 Syringe로 주입하여 Sample Cell을 세척 후 Sample을 주입하고 Measurement – Run Video Acquisition – SOP 선택 – OK
순으로 세척 – 분석 – 세척 – 분석을 반복합니다.
결론적으로, Zetaview 나노입자추적분석기는 운용 절차가 Syringe를 통한 샘플이나 Buffer의 주입 이외에는 모두 소프트웨어 클릭으로 이루어지므로 사용자간 편차가 거의 없고 정확한 분석 결과를 얻을 수 있으며 아래와 같은 장점이 있습니다.
A. 1 Click 자동 초점
B. 1 Click 자동 Sample Cell 세척
C. 11 Position 스캐닝 분석으로 샘플의 분산성, 응집성 확인 및 분석
D. Zeta Potential 분석
E. Anti-Bleaching 기능으로 정확한 형광(Fluorescence Mode)모드 분석
F. 기기 1대에 최대 4개의 Laser 동시 장착으로 한 샘플 내 4 종류의 형광 분석
G. 샘플 내 성분이 다른 입자 구분 분석 – Sub population 기능
H. 빠른 분석 속도 - 1분에 1,000개(33nL) 이상의 입자 분석
I. 분석 해상도, 속도 조절을 통해 다양한 종류의 샘플 분석
J. 동영상 압축 기능을 통한 100MB이내의 AVI 동영상 자동 저장
Zetaview 나노입자추적분석기에 대한 문의 사항이 있으시면 국내 단독 대리점, 위드인스트루먼트 02-6956-1935, with@withinstrument.com 으로 언제든지 연락주시기 바랍니다. 감사합니다.
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